Проточные цитометры: анализаторы и сортеры Выбраны параметры: Single Cell Biotech, Китай

RACS-Seq — это интегрированная система инструментов, которая объединяет профилирование метаболических явлений отдельных клеток, рамановскую сортировку клеток, подготовку образцов для секвенирования генома отдельных клеток и культивирования отдельных клеток. Благодаря технологии рамановской спектроскопии одиночных клеток с меченым стабильным изотопом субстратом, RACS-Seq позволяет проводить прямую классификацию видов микроорганизмов и измерение широкого спектра метаболических фенотипов (и их межклеточной гетерогенности) для отдельных клеток бескультивационным способом.

В RACS-Seq каждая отдельная клетка, отсортированная на основе ее метаболического феномена с помощью оптических пинцетов, может быть инкапсулирована в микрокаплю для амплификации ДНК/РНК одиночной клетки, что позволяет получать библиотеки нуклеиновых кислот одиночных клеток с высоким уровнем покрытия и низким уровнем систематической ошибки. Кроме того, с помощью этого прибора можно сортировать и культивировать отдельные бактериальные клетки в микрокаплях.

Первый коммерческий инструмент для рамановской сортировки и секвенирования одиночных клеток. Финансируется программой инноваций в области научных приборов CAS, финансируется программой развития научного приборостроения NSFC.

Особенности продукта RACS-Seq

• Быстрое многомерное фенотипическое профилирование метаболических явлений без маркировки:
• преимущество рамановской спектроскопии одиночных клеток состоит в том, что она не требует маркировки, не разрушает образец и позволяет быстро измерить метаболические фенотипы клеток, а также может быть дополнена секвенированием отдельных клеток. На основе рамановских спектров можно идентифицировать отдельные виды клеток, а также параллельно анализировать межклеточную гетерогенность и группы метаболических фенотипов по таким параметрам как метаболизм субстрата, синтез веществ, сети взаимодействия метаболитов, экологический стресс и межвидовые взаимодействия;
• точное, быстрое и легкое получение клеток-мишеней с сохранением их активности in situ:
• основанный на запатентованном чипе RAGE, RACS-Seq может легко контролировать траекторию движения отдельных клеток (диаметром> 0,5 мкм) целевых спектров рамановского рассеяния с помощью оптического пинцета, точно фиксировать их, а затем быстро экспортировать в микрокапли пиколитрового размера. Он обеспечивает сортировку отдельных функционально активных клеток на основе метаболических признаков по принципу «вы получаете то, что видите»;
• экстракция и амплификация одноклеточной ДНК/РНК с низким уровнем систематической ошибки и высоким охватом последовательностей:
• благодаря запатентованной технологии RAGE-Seq, RACS-Seq значительно снижает погрешность множественной амплификации смещения (MDA). Покрытие всей последовательности генома одной клетки E. coli может достигать более 90% (за счет амплификации пиколитровых количеств ДНК одиночных клеток в микрокаплях), что намного выше, чем в контрольной группе (23%; амплификация в микролитровых объёмах).

Технические параметры сортера RACS-Seq

Области применения	Клетки и ткани человека и животных, исследование образцов окружающей среды, океана, почвенной флоры
Размер клеток	1-35 мкм (клетки бактерий и грибов); может быть увеличен для клеток микроводорослей, растений, животных и человека
Загрузочная концентрация	10⁴ КОЕ/мл
Сортировочная среда	жидкая фаза
Метод сортировки	оптический пинцет
Скорость сортировки	2-10 активных единичных клеток/мин
Скорость метаболического анализа	20-200 клеток/мин
Процент одиночных клеток	80-100%

Этот инструмент может аккуратно и точно сортировать in situ отдельные активные клетки, обеспечивая систематическое решение для наблюдения и мониторинга, захвата, манипулирования, разделения и извлечения отдельных клеток, реализуя концепцию «вы получаете то, что видите».

EasySort Compact легко контролирует траекторию движения отдельных клеток с помощью оптического пинцета и использует уникальную запатентованную технологию RAGE (Raman-Activated Gravity-driven single-cell Encapsulation), основанную на гравитации, позволяющую быстро упаковать любую целевую клетку диаметром более 1 мкм в единичную каплю, которые можно затем использовать для дальнейших экспериментов. EasySort Compact может широко использоваться в различных типах экспериментов по выделению, сортировке, культивированию и секвенированию единичных клеток.

Впервые достигается надежная сортировка и микрокапельное капсулирование отдельных бактерий в сложных образцах для обеспечения жизнеспособности клеток и качества ДНК/РНК.

Особенности продукта EasySort Compact

• Сортировка одиночных клеток с сохранением их активности in situ;
• запатентованная технология RAGE (Raman-Activated Gravity-driven single-cell Encapsulation):
• клетки сортируются в растворе водной микросреды для максимального сохранения метаболической активности одиночных клеток;
• многорежимная визуализация:
• встроенные модули светлого поля и флуоресценции;
• поддержка сортировки отдельных клеток под светлопольным, флуоресцентным или рамановским микроскопом для обеспечения максимальной гибкости при идентификации клеток-мишеней;
• защита от загрязнения:
• встроенный светодиод для УФ-стерилизации;
• отдельное пространство для сортировки образцов, чтобы свести к минимуму любое потенциальное экспериментальное загрязнение;
• полностью интегрированная конструкция системы:
• с дружественным пользовательским интерфейсом, требующим лишь минимального обучения.

Технические параметры сортера EasySort Compact

Области применения	Клетки и ткани человека и животных, исследование образцов окружающей среды, океана, почвенной флоры
Размер клеток	0,5-50 мкм
Загрузочная концентрация	10⁴ КОЕ/мл
Сортировочная среда	жидкая фаза
Метод сортировки	оптический пинцет
Скорость сортировки	2-10 активных единичных клеток/мин
Процент одиночных клеток	80-100%

FlowRACS, автоматизированная система сортировки отдельных клеток, основанная на технологии диэлектрического гистерезиса в высокоскоростном потоке жидкости pDEP-RACS (positive dielectrophoresis-based Raman-activated droplet sorting), позволяет определять характеристики клеток на основе метаболических феномов и сортировать их на высокой скорости с помощью спектров комбинационного рассеяния света. FlowRACS работает с клетками без маркировки или окрашивания, в процессе анализа клетки сохраняют жизнеспособность.

FlowRACS не требует изоляции и культивирования, напрямую идентифицирует отдельные виды клеток и может анализировать метаболизм субстрата, синтез веществ, сети взаимодействия метаболитов, экологический стресс, межвидовые взаимодействия и т. д. в параллельных группах метаболических фенотипов и их межклеточную гетерогенность.

В процессе анализа клетки выстраиваются в линию и последовательно на высокой скорости проходят через точку опроса для получения спектра комбинационного рассеяния. После получения спектров собираются только клетки (или микрокапли, содержащие отдельные клетки) с целевыми спектрами комбинационного рассеяния света (т.е. целевыми метаболическими функциями). Пропускная способность FlowRACS в настоящее время составляет 300-600 клеток/мин.

Ее оригинальная технология pDEP-RACS точно улавливает и собирает одноклеточные рамановские сигналы на основе диэлектрического гистерезиса в высокоскоростном потоке жидкости, преодолевая ограничения пропускной способности рамановской сортировки отдельных ячеек и тем самым завершая одноклеточные рамановские сигналы. Интеграция сбора и сортировки отдельных клеток (и экспорта микрокапель).

FlowRACS использует алгоритм анализа полного рамановского спектра, который интерпретирует и ищет рамановский спектр в режиме реального времени. Прибор представляет собой решение нового поколения для быстрого и недорогого профилирования метаболических явлений, функционального анализа природных клеток и ферментов, а также анализа механизмов функционирования сложных биологических систем, и все это с разрешением одной клетки.

Особенности продукта FlowRACS

• Получение спектров комбинационного рассеяния одиночных клеток c исключительным качеством:
• оригинальная технология pDEP-RACS используется для обеспечения точного захвата одиночных клеток на высокой скорости в точке опроса рамановским лазером. Применение диэлектрического гистерезиса эффективно решает проблему слабых рамановских сигналов клеток в высокоскоростном потоке жидкости и обеспечивает высококачественную рамановскую визуализацию;
• полностью автоматизированная высокопроизводительная сортировка отдельных клеток:
• технология диэлектрического детерминированного латерального смещения (pDEP-DLD) используется для достижения эффективной фокусировки для формирования потока одиночных клеток и высокопроизводительной сортировки клеток-мишеней (пропускная способность сортировки 300-600 клеток/мин);
• максимальное сохранение жизнеспособности клеток:
• рамановский сбор и сортировка одиночных клеток выполняются в жидкой среде, которая в наибольшей степени сохраняет активность клеток и целостность генома, не требуют использования внешних меток и могут быть совмещены с последующимс культивированием и секвенированием одиночных клеток;
• интеллектуальный анализ данных:
• алгоритм анализа полного рамановского спектра одиночных клеток в режиме реального времени обеспечивает универсальное решение для анализа метаболического фенотипа отдельных клеток, сортировки и интеллектуального анализа данных.

Технические параметры cортера FlowRACS

• Сортируемыйе объекты — клетки прокариот и эукариот;
• размер клеток, мкм — 5-40;
• рабочая концентрация, КОЕ/мл —10²-10³;
• сортировочная среда — жидкая фаза;
• сортировка методом диэлектрического гистерезиса в потоке жидкости (pDEP-RACS);
• скорость сортировки, событий/мин — до 600;
• скорость анализа, событий/мин — до 720 событий/мин;
• скорость потока жидкости, мкл/мин — 10-40;
• стабильное время работы, час — более 5;
• объектив микроскопа — 10×/50×/60× водоиммерсионный объектив/100×;
• высокоскоростная цветная камера с CCD-матрицей с разрешением 5 Мп;
• спектральное разрешение, см⁻¹ — до 8;
• пространственное разрешение, мкм — до 1,5.

Комплект поставки: сортер клеточный FlowRACS с Раман детектором, Single Cell Biotech, Китай; управляющая станция с монитором, на базе ПК; антивибрационная платформа.

Этот инструмент может аккуратно и точно сортировать in situ отдельные активные клетки, обеспечивая систематическое решение для наблюдения и мониторинга, захвата, манипулирования, разделения и извлечения отдельных клеток, реализуя концепцию «вы получаете то, что видите».

EasySort легко контролирует траекторию движения отдельных клеток с помощью оптического пинцета и использует уникальную запатентованную технологию, основанную на гравитации, для быстрой упаковки любых целевых одиночных клеток диаметром более 1 мкм в отдельные капли, которые можно использовать для последующих экспериментов. EasySort может широко использоваться в различных типах экспериментов по выделению, сортировке, культивированию и секвенированию отдельных клеток.

Впервые реализован механизм надежной сортировки и микрокапельной упаковки одиночных бактерий в сложные образцы, обеспечивающий жизнеспособность клеток и качество ДНК/РНК. Данные модули сортировки отдельных клеток совместимы с высокотехнологичными микроскопами/прецизионными спектрометрами таких ведущих мировых производителей как Thermo Fisher и HORIBA.

Особенности продукта EasySort Lego

• Сортировка одиночных клеток с сохранением их активности in situ;
• запатентованная технология RAGE (Raman-Activated Gravity-driven single-cell Encapsulation):
• клетки сортируются в растворе водной микросреды для максимального сохранения метаболической активности одиночных клеток;
• гибкое подключение к светлопольному/флуоресцентному/рамановскому микроскопу:
• служит модулем сортировки одиночных клеток для высококачественных микроспектрометров и микроскопов компаний Thermo Fisher, HORIBA и других ведущих производителей точных приборов.

Технические параметры cортера EasySort Lego

Области	Клетки и ткани человека и животных, исследование образцов окружающей среды, океана, почвенной флоры
Размер клеток	0,5-50 мкм
Загрузочная концентрация	10⁴ КОЕ/мл
Сортировочная среда	жидкая фаза
Метод сортировки	оптический пинцет
Скорость сортировки	2-10 активных единичных клеток/мин
Процент одиночных клеток	80-100%