Ферменты Выбраны параметры: DiaGene, Россия

Smart транспозаза Tn5 - это универсальный фермент, который случайным образом гидролизует ДНК и одновременно встраивает олигонуклеотидные последовательсти в ДНК-мишень. Smart транспозаза Tn5 выделена из штамма E.coli, несущего модифицированный клонированный ген транспозазы T5.

Применение Smart Транспозазы Tn5: конструирование бибилиотек для NGS.

Комплект поставки: Smart транспозаза Tn5; 5х буфер для проведения реакции, 5х буфер с ДМФА (N,N-Диметилформамид) для проведения реакции.

Условия хранения: -20 °С.

T4 ДНК лигаза катализирует образование фосфодиэфирной связи между 5`-фосфатной и 3`-гидроксильными концевыми группами ДНК или РНК, выделена из штамма E.coli, несущего клонированный ген ДНК-лигазы из фага T4. Необходим АТФ в качестве кофактора.

Применение T4 ДНК лигазы

• Клонирование ДНК;
• лигирование «тупых» и «липких» концов ДНК;
• присоединение линкеров или адаптеров к двуцепочечной ДНК;
• восстановление одноцепочечных разрывов в двуцепочечной ДНК, РНК или гибридах ДНК/РНК;
• лигазная детекция;
• сайт-направленный мутагенез.

Комплект поставки: T4 лигаза; 10х буфер для проведения реакции.

Условия хранения: -20 °С.

Taq ДНК-лигаза катализирует образование фосфодиэфирной связи между совмещенными 5 ́ фосфатом и 3 ́ гидроксильными концами двух соседних нуклеотидов в контексте двухцепочечной молекулы ДНК. Лигирование будет происходить только в том случае, если смежные нуклеотиды идеально спарены и не имеют зазоров между ними, что позволяет использовать этот фермент в качестве инструмента для обнаружения замещений с одним основанием. Taq ДНК-лигаза использует NAD + в качестве кофактора.

Особенности Taq ДНК-лигазы

• Термостабильность – проявляет максимальную активность при 45-70 °С;
• селективно лигирует ники в 2-цепочечной ДНК;
• не является заменой T4 ДНК лигазе;
• NAD-зависимая ДНК-лигаза;
• высокая точность лигирования.

Применение Taq ДНК лигазы

• Клонирование методом Гибсона;
• высокоточное лигирование;
• лигазная цепная реакция (LCR – ligase chain reaction);
• обнаружение однонуклеотидных замен;
• сборка генов;
• сайт-направленный мутагенез.

Комплект поставки: Taq ДНК лигаза; 10х буфер для проведения реакции; NAD (Никотинамид-ß-аденин динуклеотид).

Условия хранения: -20 °С.

Т4 ДНК-лигаза FastLink в высокой концентрации предназначен для быстрого лигирования тупых и липких концов фрагментов ДНК в течение 5 минут при 25 °С. Набор может использоваться при клонировании ДНК (в частности T/A клонирование), создании библиотек и лигировании линкеров.

Комплект поставки: Т4 ДНК-лигаза FastLink, 2х буфер для лигирования.

Условия хранения: -20 °С.

Pfu ДНК-полимераза высокоточная — это термостабильный фермент, выделенный из штамма E. сoli, содержащего клонированный ген из Pyrococcus furiosus.

Фермент катализирует матричный синтез ДНК путем полимеризации нуклеотидов в направлении 5'→3' в присутствии ионов магния, обладает 3'→5' экзонуклеазной (корректирующей) активностью, что позволяет ферменту вести точный синтез ДНК, устраняя неправильно включенные основания с помощью корректирующей активности. Pfu ДНК-полимераза синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

Особенности Pfu ДНК-полимеразы

• 3'-5' экзонуклеазная активность обеспечивает более точный синтез ДНК;
• высокая термостабильность;
• синтез ПЦР-продуктов с тупыми концами.

Применение Pfu ДНК-полимеразы

• Высокоточная ПЦР;
• получение ПЦР-продуктов для клонирования;
• сайт-направленный мутагенез.

Комплект поставки: Pfu ДНК-полимераза, 10х буфер для проведения реакции.

Условия хранения: -20 °С.

ДНК-полимераза RTaq является модифицированной версией термостабильной Taq ДНК-полимеразы обратимо химически инактивированной для реализации технологии «горячего старта», позволяющей при комнатной температуре проводить подготовку реакции амплификации и исключающей образование неспецифических ПЦР-продуктов и димеров-праймеров. Активация фермента происходит в течение первой денатурации, дополнительный нагрев не требуется. RTaq ДНК-полимераза специально разработана для проведения моно- и мультиплексных ПЦР и ОТ-ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Особенности RTaq ДНК-полимеразы

• Повышенная специфичность синтеза ПЦР-продуктов;
• возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре;
• высокая точность синтеза: в 15 раза выше по сравнению с Taq ДНК-полимеразой;
• умеренная устойчивость к ингибиторам;
• получение ПЦР-продуктов с 3' dA-концами;
• обладает 5' → 3' полимеразной активностью;
• обладает 5' → 3' экзонуклеазной активностью.

Области применения RTaq ДНК-полимеразы

• Моно- и мультиплексная ПЦР с детекцией в режиме реального времени;
• ОТ-ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Комплект поставки: RTaq ДНК-полимераза; 10х буфер для проведения реакции, содержащий 20 мМ MgCl₂.

Условия хранения: -20 °С.

ДНК-полимераза Smart HS c «горячим стартом» представляет собой химически модифицированную рекомбинантную Taq ДНК-полимеразу, в которой термолабильные блокирующие группы, присоединенные к аминокислотным остаткам полимеразы, инактивируют фермент. Данный метод «горячего старта» позволяет проводить подготовку реакции при комнатной температуре и обеспечивает повышенную специфичность при амплификации. Амплифицированные с помощью Smart HS ДНК-полимеразы ПЦР-продукты имеют выступающие дезоксиаденозиновые концы, что позволяет в последующем клонировать ПЦР-продукты в Т-вектора.

Особенности ДНК-полимеразы Smart HS

• Повышенная специфичность обусловленная технологией горячего старта;
• подготовка реакции при комнатной температуре.

Области применения ДНК-полимераза Smart HS

• Рутинная ПЦР;
• ПЦР в реальном времени;
• мультиплексная ПЦР;
• ОТ-ПЦР;
• синтез ПЦР-продуктов для ТА-клонирования;
• генотипирование.

Комплект поставки: ДНК-полимераза Smart HS, 10х буфер для проведения реакции.

Условия хранения: -20 °С.

ДНК-полимераза Super Fusion – это высокоточная ДНК-полимераза c горячим стартом состоит из ДНК-связывающего домена Sso7d из Saccharolobus solfataricus слитого с Pfu ДНК-полимеразой Pyrococcus furiosus и благодаря этому амплифицирует ПЦР-продукты с очень высокой скоростью и точностью, в 15 раз точнее, чем Taq ДНК полимераза, обладает устойчивостью к ингибиторам и может быть использована для синтеза сложных, GC-богатых и длинных ампликонов длиной до 30 тыс. п.н.

Технологии горячего старта реализованного в полимеразе дает возможность постановки ПЦР-реакции при комнатной температуре и исключает деградацию праймеров и матрицы во время подготовки ПЦР, а также уменьшает вероятность образования неспецифических ПЦР-продуктов.

ДНК-полимераза Super Fusion незаменима для генно-инженерных приложений в которых последовательность ПЦР-продуктов должна полностью соответствовать матрице.

Особенности ДНК-полимеразы Super Fusion

• Высокая точность синтеза: в 15 раза выше по сравнению сTaq ДНК-полимеразой;
• амплифицикация фрагментов длиной до 30 тыс. п.н.;
• амплифицикация сложных и GC-богатых участков ДНК;
• возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре;
• повышенная специфичность синтеза, отсутствие деградации праймеров и матрицы в процессе подготовки ПЦР;
• высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• устойчивость к ингибиторам;
• обладает 5' → 3' полимеразной активностью;
• обладает 3' → 5' экзонуклеазной активностью;
• очищена от плазмидной и геномной ДНК E.coli и подходит для молекулярно-биологических работ с E.coli.

Области применения ДНК-полимераза Super Fusion

• Высокоточная ПЦР;
• амплификация длинных фрагментов ДНК: до 30 тыс. п.о.;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мультиплексная ПЦР;
• аналих на основе микрочипов.

Комплект поставки: ДНК-полимераза Super Fusion; 5х буфер для проведения реакции, содержащий 7,5 мМ MgSO₄.

Условия хранения: -20 °С.

Рекомбинантная форма, выделенная из E. coli.

Буфер хранения: 50 мМ Трис-HCl, pH 8,0 (при 25°С), 50 мМ NaCl, 0,1 мМ ЭДТА, 1 мМ дитиотрейтол, 50 % глицерин и 1 % Тритон Х-100.

Определение единицы активности: За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 10 нмоль dNTP в кислотонерастворимый продукт за 30 мин при 74°С.

Условия реакции: 50 мМ трис-HCl, pH 9,0 (при 25° С), 50 мМ NaCl, 10 мМ MgCl₂, 200 мM dATP, 200 мM dCTP, 200 мM dGTP, 50 мM [3H] dTTP, 0,25 мг/мл активированной ДНК из тимуса теленка.

Хранение и транспортировка: -20°С.

Pfu-HP ДНК-полимераза высокоточная является улучшенным вариантом Pfu ДНК-полимеразы, обладает большей стабильностью к ингибирующим агентам, более высокой 5'-3' полимеразной активностью и 3'-5' экзонуклеазной корректирующей активностью, синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

Особенности Pfu-HP ДНК-полимеразы

• Высокая 3'-5' экзонуклеазная активность;
• высокая 5'-3' полимеразной активность;
• высокая термостабильность;
• стабильность к ингибирующим агентам;
• синтез ПЦР-продуктов с тупыми концами.

Применение Pfu-HP ДНК-полимеразы

• Высокоточная ПЦР;
• получение ПЦР-продуктов для клонирования;
• ПЦР GC-богатых матриц;
• ПЦР длинных фрагментов;
• сайт-направленный мутагенез.

Комплект поставки: Pfu-HP ДНК-полимераза, 5х буфер для проведения реакции.

Условия хранения: -20 °С.

Транскриптаза обратная Smart RT проявляет максимальную активность при температуре 35-42 °С, катализирует матричный синтез ДНК используя в качестве матрицы РНК, при этом не обладает активностью РНКазы Н и 3' → 5' экзонуклеазной активностью. Для проведения реакции необходимо наличие random-праймера.

Особенности Транскриптазы обратной Smart RT

• Оптимальная температура, °С - 35-42;
• отсутствие активности РНКазы Н;
• отсутствие 3' → 5' экзонуклеазной активности.

Области применения транскриптазы обратной Smart RT

• Синтез кДНК по матрице РНК;
• ОТ-ПЦР;
• мультиплексная ОТ-ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Комплект поставки: транскриптаза обратная Smart RT, 10х буфер для проведения реакции, 100 мМ DTT.

Условия хранения: -20 °С.

Транскриптаза обратная Super RT обладает повышенной термической стабильностью и проявляет максимальную активность в широком диапазоне температур от 25 до 70 °С, катализирует матричный синтез ДНК по матрице РНК, при этом не обладает активностью РНКазы Н и 3' → 5' экзонуклеазной активностью. Благодаря повышенной термостабильности Транскриптаза обратная Super RT позволяет проводить реакцию обратной транскрипции при повышенных температурах и использовать в качестве матрицы РНК со сложной вторичной структурой

Особенности Транскриптазы обратной Super RT

• Широкий диапазон температур активности – от 25 до 70 °С
• проведение обратной транскрипции по матрице РНК имеющей сложную вторичную структуру;
• отсутствие активности РНКазы Н;
• отсутствие 3' → 5' экзонуклеазной активности.
  

Области применения транскриптазы обратной Super RT

• Обратная транскрипция;
• ОТ-ПЦР;
• мультиплексная ОТ-ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Комплект поставки: транскриптаза обратная Super RT, 10х буфер для проведения реакции, 100 мМ DTT.

Условия хранения: -20 °С.

Транскриптаза обратная термостабильная Smart RTT проявляет максимальную активность при температуре 55 °С, катализирует матричный синтез ДНК используя в качестве матрицы РНК, при этом не обладает активностью РНКазы Н и 3' → 5' экзонуклеазной активностью. Для проведения реакции необходимо наличие random-праймера

Особенности транскриптазы обратной термостабильной Smart RTT

• Оптимальная температура, °С – 55;
• проведение обратной транскрипции с образцов РНК со сложной вторичной структурой;
• отсутствие активности РНКазы Н;
• отсутствие 3' → 5' экзонуклеазной активности.

Области применения транскриптазы обратной термостабильной Smart RTT

• Обратная транскрипция;
• ОТ-ПЦР;
• мультиплексная ОТ-ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Комплект поставки: транскриптаза обратная термостабильная Smart RTT, 10х буфер для проведения реакции, 100 мМ DTT.

Условия хранения: -20 °С.

Фрагмент Кленова (3'→5' exo-) представляет собой большой фрагмент ДНК-полимеразы I E.coli (фрагмент Кленова), выделен из штамма E.coli, содержащего ген ДНК-полимеразы I E.coli (Фрагмент Кленова), фермент сохраняет 5' → 3' полимеразную активность, но не обладает как 5' → 3', так и 3' → 5' экзонуклеазной активностью ДНК-полимеразы I.

Особенности Фрагмента Кленова (3'→5' exo-)

• Обладает 5' → 3 'полимеразной активностью;
• не обладает 5' → 3' экзонуклеазной активностью;
• не обладает 3' → 5' экзонуклеазной активностью;
• включает модифицированные нуклеотиды, такие как Cy3-, Cy5-, аминоаллил-, биотин-, дигоксигенин- и флуоресцентно-меченные нуклеотиды в последовательность ДНК;
• совместим с большинством реакционных буферных растворов.

Области применения Фрагмента Кленова (3'→5' exo-)

• Синтез комплементарной цепи по матрице кДНК;
• сайт-направленный мутагенез с использованием специфических праймеров;
• введение меток различной природы в последовательность ДНК;
• введение меток в случайные праймеры;
• секвенирование ДНК методом Сэнгера;
• создание библиотек для NGS.

Комплект поставки: фрагмент Кленова (3'→5' exo-); 10х буфер для проведения реакции.

Условия хранения: -20 °С.

Фрагмент Кленова представляет собой большой фрагмент ДНК-полимеразы I E.coli, выделен из штамма E.coli, содержащего ген ДНК-полимеразы I, обладает 5' → 3' полимеразной активностью и 3' → 5' экзонуклеазной (корректирующей) активностью, но не обладает 5' → 3' экзонуклеазной активностью ДНК-полимеразы I.

Особенности Фрагмента Кленова

• Включает модифицированные нуклеотиды, такие как Cy3-, Cy5-, аминоаллил-, биотин-, дигоксигенин- и флуоресцентно-меченные нуклеотиды, в последовательность ДНК;
• обладает 5' → 3' полимеразной активностью;
• обладает 3' → 5' экзонуклеазной (корректирующей) активностью;
• не обладает 5' →3' экзонуклеазной активностью ДНК-полимеразы I;
• совместим с большинством реакционных буферных растворов.

Применение Фрагмента Кленова

• Введение меток различной природы в последовательность ДНК;
• введение меток в случайные праймеры;
• удаление 3'-выступающих концов или достраивания 5'-недостающих концов ДНК;
• синтез комплементарной цепи по матрице кДНК;
• сайт-специфический мутагенез с синтетическими олигонуклеотидами;
• секвенирование по Сэнгеру.

Комплект поставки: фрагмент Кленова; 10х буфер для проведения реакции.

Условия хранения: -20 °С.

Эндонуклеаза выделена из штамма E.coli, несущего модифицированный клонированный ген NucA неспецифической эндонуклеазы Serratia marcescens. Это высокопроцессивный фермент, который активен при различных условиях и температурах: от 0 °С до 44 °С и рН от 6 до 10, с оптимумом pH 8,8. Фермент не обладает протеолитической активностью и поэтому является идеальным инструментом для удаления нуклеиновых кислот из образцов белков или эффективной альтернативой ультразвуковой обработке. Гидролизует как одноцепочечную, так и двухцепочечную ДНК и РНК до фрагментов размером 2-5 п.о., не обладает специфичностью к последовательности.

Характеристики эндонуклеазы

• Aктивна при различных условиях и температурах;
• при температуре выше 60 °С обратимо инактивируется;
• сложно инактивируется и обладает высокой активностью;
• не обладает протеолитической активностью;
• гидролизует как одноцепочечную, так и двухцепочечную ДНК и РНК;
• не обладает специфичностью к последовательности;
• заменяет ультразвуковую обработку, сопровождающуюся нагреванием образца и дестабилизацией белка.

Применение эндонуклеазы

• Деградация высокомолекулярной ДНК при лизисе клеток, снижение вязкости лизатов;
• удаление ДНК и РНК из образцов белка;
• удаление загрязнения нуклеиновыми кислотами продуктов рекомбинантной ДНК.

Комплект поставки: эндонуклеаза.

Условия хранения: -20 °С.

Эндонуклеаза термолабильная выделена из штамма E.coli, несущего модифицированный клонированный ген NucA неспецифической эндонуклеазы Serratia marcescens. Фермент необратимо инактивируется при температуре выше 60°С. Эндонуклеаза термолабильная высокопроцессивна, активна при различных условиях и температурах: от 0°С до 44°С и рН от 6 до 10, с оптимумом pH 8,8, не обладает протеолитической активностью, поэтому является идеальным инструментом для удаления нуклеиновых кислот из образцов белков и эффективной альтернативой ультразвуковой обработке, гидролизует как одноцепочечную, так и двухцепочечную ДНК и РНК до фрагментов размером 2-5 п.о., не обладает специфичностью к последовательности.

Характеристики эндонуклеазы термолабильной

• Необратимо инактивируется при температуре выше 60 °С;
• активна при различных условиях и температурах;
• не обладает протеолитической активностью;
• гидролизует как одноцепочечную, так и двухцепочечную ДНК и РНК;
• не обладает специфичностью к последовательности;
• заменяет ультразвуковую обработку, сопровождающуюся нагреванием образца и дестабилизацией белка.

Применение эндонуклеазы термолабильной

• Деградация высокомолекулярной ДНК при лизисе клеток;
• снижение вязкости лизатов;
• удаление ДНК и РНК из образцов белка;
• удаление загрязнения нуклеиновыми кислотами продуктов рекомбинантной ДНК.

Комплект поставки: эндонуклеаза термолабильная.

Условия хранения: -20 °С.