История
История
Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) является одной из базовых техник, широко и рутинно применяемых в молекулярно-биологических исследованиях и прикладных задачах. Классическая ПЦР требует высокой степени чистоты препаратов ДНК или РНК, поскольку различные примеси могут ингибировать действие полимеразы и делать невозможной амплификацию целевых продуктов даже при наличии соответствующей матрицы.
Прямая ПЦР является модификацией классического метода, в котором отсутствует этап выделения и очистки препаратов нуклеиновых кислот. В качестве образца используется неочищенный лизат тканей. Образцы крови добавляются напрямую в реакционную смесь для ПЦР, минуя отдельную стадию лизиса. Исключение этапа выделения приводит к уменьшению времени анализа, а также снижает вероятность контаминации и ложноотрицательных результатов (вследствие утраты во время очистки образцов, содержащих малые количества целевых нуклеиновых кислот).
Мы предлагаем линейку наборов для прямой ПЦР производства Vazyme (Китай):
Наборы (за исключением последнего) содержат один или два буфера для лизиса. Лизис происходит в течение 10-20 минут в присутствии протеиназы К (инактивируется нагреванием до 95°С в течение пяти минут). Сразу после этого лизат можно использовать для проведения ПЦР, либо хранить при -20 °С в течение трех месяцев.
Лизат вносится в реакционную смесь (мастермикс), которая содержит все необходимые компоненты для проведения ПЦР кроме праймеров. В состав мастермикса входят модифицированные полимеразы AceTaq DNA Polymerase либо Phanta Blood Super-Fidelity DNA Polymerase, которые работают по принципу горячего старта – ферменты неактивны при низких температурах, и для восстановления полимеразной активности требуется высокотемпературная активация (95 °С и 98 °С, соответственно в течение пяти минут). За счет горячего старта исключается накопление неспецифических продуктов ПЦР. Производитель гарантирует, что мастермиксы пригодны для постановки мультиплексных ПЦР – до четырех праймеров в одной реакции, т.е. два целевых продукта.
Информация для заказа:
PD103-01
|
|||||||||||||||||||||||||||
Набор Blood Direct PCR предназначен для проведения прямой ПЦР непосредственно из образцов цельной крови без необходимости пробоподготовки или выделения ДНК. В качестве образцов может использоваться свежая кровь, кровь, хранящаяся при 4 °С, замороженная кровь и сухая кровь, хранящиеся на картах для сбора образцов крови (например, Whatman 903 или FTA). Набор совместим со всеми традиционными антикоагулянтами (ЭДТА, цитрат, гепарин и др.), содержит высокоточную ДНК-полимеразу Phanta Blood Super-Fidelity, устойчивую к ингибиторам, содержащимся в цельной крови, и способной проявлять полимеразную активность даже в растворах с концентрацией крови до 40%. Набор Blood Direct PCR Kit V2 позволяет амплифицировать фрагменты ДНК размером до 10 т.п.н., образуя ПЦР-продукты с тупыми концами.
Преимущества набора Blood Direct PCR
Условия хранения: -20 °С. |
|||||||||||||||||||||||||||
PD101-01
|
|
200 реакций
|
|
По запросу По запросу |
|
|
|
||||||||||||||||||||
Набор One Step Mouse Genotyping предназначен для быстрого генотипирования мышей, содержит все необходимые реагенты для выделения ДНК и постановки ПЦР. Набор можно использовать для быстрого выделения геномной ДНК из тканей мышей. Мышиную ткань помещают в лизирующий буфер с протеиназой К, инкубируют при 55 °С в течение 20 мин, затем нагревают до 95 °С в течение 5 мин для инактивации протеиназы К. Полученный лизат после центрифугирования можно использовать в качестве матрицы для проведения ПЦР без дополнительной очистки ДНК. В составе набора имеется 2×Taq Plus Master Mix (Dye Plus), который содержит высокоэффективную ДНК-полимеразу Taq Plus и смесь dNTP, для постановки ПЦР необходимо только добавить праймеры и матрицу (лизат) в реакционную смесь. Таким образом, при работе с набором сокращается количество открывания/закрывания пробирок и пипетирования, что значительно снижает вероятность перекрестного загрязнения образцов, повышает производительность и воспроизводимость результатов. Мастермикс сохраняет стабильность после многократного замораживания и оттаивания. Также Мастермикс содержит в своем составе краситель для нанесения на гель, поэтому электрофорез можно проводить сразу после завершения ПЦР. Преимущества набора One Step Mouse Genotyping
Условия хранения: буфер для лизиса тканей мыши при 2~8 °С; остальные компоненты при -20 °С. |
|||||||||||||||||||||||||||
PD104-01
|
|
200 реакций
|
|
По запросу По запросу |
|
|
|
||||||||||||||||||||
Набор содержит полный комплект реагентов для выделения неочищенной ДНК из тканей животных и постановки кПЦР, кроме праймеров, матрицы и зондов, пригоден для быстрого генотипирования мышей, позволяет в сжатые сроки получить геномную ДНК из тканей мышей, таких как таких как мышиные хвосты, уши и пальцы лап. Продукты лизиса без этапа очистки амплифицируются с помощью кПЦР, что позволяет избежать многократного пипетирования, открывания/закрывания крышек пробирок. Результаты генотипирования рассчитываются непосредственно с помощью программного обеспечения, без необходимости ручной проверки. В наборе используется система защиты от загрязнений dUTP/UDG, при помощи которой при комнатной температуре происходит гидролиз урацил-содержащих загрязнителей. Это значительно уменьшает аэрозольное загрязнение и повышает производительность и воспроизводимость результатов. Преимущества набора One Step U+ Probe Mouse Genotyping
Компоненты набора:
*-Содержит AceTaq ДНК полимеразу, dNTP Mix, Mg²⁺. Условия хранения: все компонеты набора храняться при -20 °С; буфер для лизиса тканей мыши при 4 °С. |
|||||||||||||||||||||||||||
PD105-01
|
|||||||||||||||||||||||||||
Набор предназначен для проведения прямой ПЦР Plant Direct PCR непосредственно из листьев растений, семян и других растительных тканей, без предварительного выделения ДНК. Также он может использоваться для высокопроизводительного скрининга растительных образцов, не содержащих полисахариды и полифенолы. В наборе применяется специально разработанная ДНК-полимераза, сохраняющая высокую устойчивость к растительным ингибиторам ПЦР, способная синтезировать фрагменты ДНК длиной до 5 т.п.н. Входящий в состав набора буфер А эффективно лизирует свежие и замороженные растительные ткани. Полученный лизат пригоден для использования в качестве матрицы в ПЦР без предварительной очистки ДНК. Благодаря специально подобранному составу лизирующего буфера, лизат можно использовать длительное время, даже при многочисленных циклах замораживания и оттаивания. Для проведения амплификации нужно просто добавить праймеры и матрицу в оптимизированный мастер-микс Plant Direct. Преимущества набора Plant Direct PCR
Компоненты набора:
Условия хранения: мастер-микс Plant Direct храниться при -20 °С, избегая циклов замораживания и оттаивания; буферы для лизиса могут храниться как при -20 °С, так и при 2-8 °С. |
|||||||||||||||||||||||||||
|
См. также:
Гель- и хемидокументирующие системы
ДНК-амплификаторы "в реальном времени"
Станции дозирования автоматические
Электрофорез: источники питания
Ниже вы можете задать вопрос или оставить запрос в свободной форме:
С помощью личного кабинета Вы сможете:
Сравнение